特别注意有机溶剂对身体特有害别是心肺；肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行 柱色谱是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望对 大家能有所帮助。1 、柱子可以分为加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间 也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发 （有时在柱子外面 有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很 大的噪音，而且时间长）。以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝 试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。
加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵 （给鱼 缸供气的就行）。特别是在容易分解的样品的分离中适用。压力不可过大，不然溶剂走的太 快就会减低分离效果。个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。2 、关于柱子的尺寸，应该是粗长的最好柱子长了，相应的塔板数就高。柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。试想 如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂 慢慢冲了。
而如果样品层只有 0.5 厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。
当然采用 粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了 （有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。现在见到的柱子径高比一 般在1 510，书中写硅胶量是样品量的3040倍，具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf在0.20.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如 200毫克的样品，用 2cmX 20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要 加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用 3cm 的，也可以减小淋洗剂的极性等等。
3、关于无水无氧柱，适用于对氧，水敏感，易分解的产品可以湿柱，也可以干柱。不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次，因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量有可能是产品分 解，毕竟要分离的是敏感的东东，小心不为过。
这个我分离的次数很少，一般都是通过紫外 灯查看的。4 、关于湿法、干法上样 湿法省事，一般用淋洗剂溶解样品，也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等，但溶剂越少越好，不 然溶剂就成了淋洗剂了。
有的上样后在硅胶上又会析出，这一般都是比较大量的样品才会出 现，是因为硅胶对样品的吸附饱和这就应该先重结晶，得到大部分的产品后再柱分，如果不 能重结晶那就不管它了，直接过就是了，样品随着淋洗剂流动会溶解的。
有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱（比如 DMF,DMSO 等，会随着溶剂一起走，显色是一个很长的脱 尾），这时就必须用干法上柱了。样品和硅胶的量有一种说法是1 1，我觉得是越少越好，但是要保证在旋干后，不能看到明显的固体颗粒（那说明有的样品没有吸附在硅胶上）。溶剂的选择。当然是最便宜，最安全，最环保的了。所以大多选用石油醚，乙酸乙酯。文献中 有写用正己烷的，太贵了。
二氯甲烷也有用的，但是要知道，它和硅胶的吸附是一个放热过 程，所以夏天的时候经常会在柱子里产生气泡，天气冷的时候会好一些。
甲醇，据说能溶解 部分的硅胶，所以产品如果想过元素分析的话要留神，应该经过后继处理，比如说重结晶等。
其他的溶剂用的相对较少，要依个人的不同需要选择了。
由于某些原因，用到的淋洗剂多是 大包装的（便宜嘛），我们这里是用 2.5 L 的塑料桶装的。另外溶剂在过柱子后最好也回收 使用，一方面环保，另一方面也能节省部分经费，当然比较忙的时候我是不回收的，太费事 了。这里要注意的是，一般在过柱同时进行的是减压旋蒸，石油醚和乙酸乙酯的比例由于挥 发度的不同会导致极性的变化，一般会使得极性变大，在梯度淋洗时比较合适，正好极性越 来越大了。
在过完柱子后，溶剂最后回收要采用常压，因为在减压旋蒸时会有部分低沸点的 杂质一起出来，常压时就会减少这种现象，如果杂质和你下面要过的样品有反应那就惨了。
5、关于操作问题5.1 装柱。柱子下面的活塞可以采用四氟节门的。
干法和湿法装柱觉得没什么区别，只要能把柱子装实 就行。装完的柱子应该要适度的紧密（太密了淋洗剂走的太慢），一定要均匀（不然样品就 会从一侧斜着下来）。书中写的都是不能见到气泡，我觉得在大多数情况下有些小气泡没太 大的影响，一加压气泡就全下来了。当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了。
但是柱子更忌讳的是开裂，甭管竖的还是横的，都会影响分离效果，甚至作废5.2 加样。用少量的溶剂溶样品加样，加完后将下面的活塞打开，待溶剂层下降至石英砂面时，再加少 量的低极性溶剂，然后再打开活塞，如此两三次，一般石英砂就基本是白色的了。
加入淋洗 剂，一开始不要加压，等溶样品的溶剂和样品层有一段距离（24cm就够了），再加压，这样避免了溶剂（如二氯甲烷等）夹带样品快速下行。5.3 淋洗剂的选择。感觉上要使所需点在 rf 在 0.3 左右的比较好。不要认为在板上爬高了分的比较开，过柱子 就用那种极性，如果 rf 在 0.6 ，即使相差 0.2 也不容易在柱子上分开，因为柱子是一个多次 爬板的状态，可以通过公式的比较 0.6/0.8 一次的分离度，肯定不如（ 0.2/0.3 ）的三次方 或四次方大。
另外，一般你的物质酸性的话淋洗剂里面要加入几滴乙酸，碱性的话通常使用 氨水或是三乙胺等弱碱。5.4 样品的收集。
用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡。
所以如果样品与硅胶的吸附比较强 的话，就不容易流出。这样就会发生，后面的点先出，而前面的点后出。这时可以采用氧化 铝作固定相。5.5 最后的处理。柱分后的产品，由于使用了大量的溶剂，其中的杂质也会累积到产品中，所以如果想送分析，最好用少量的溶剂洗涤一下，因为大部分的杂质是溶在溶剂里的，一洗基本就没了，必要时 进行重结晶。另外，再过柱的时候，有时会出现气泡，一是和使用的溶剂有关，如果是易挥发的溶剂，如 乙醚、二氯甲烷等，在室温稍高的情况下，很容易出现这种现象，因此，在室温高的时候，可以选择沸点较高，挥发相对小的溶剂。
还有，使用混合溶剂时，使用的两种溶剂的沸点应 该相差不大，如乙酸乙酯和石油醚 （6090）,而乙醚却要选择 3060 的石油醚。二是不 论是用带砂板的还是塞棉花的，在装柱之前，都要将空气用加压的方法将空气排干，这样就 可避免柱中有空气最后过柱子需要耐心，不要着急。